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分光光度计简介
上海谱元仪器有限公司是专供紫外可见分光光度计、紫外分光光度计、可见分光光度计、可见光度计等实验室仪器设备的高新技术知名厂家和经销商，电话:021-67766136。产品有双光束紫外可见分光光度计、扫描型紫外可见分光光度计、智能型紫外可见分光光度计等，此外还供应进口智能双光束紫外可见分光光度计，嵌入式工控计算机，正版Android操作系统，最小化外形设计，是一款性能可靠的紫外可见分光光度计。
分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为：(1)200～400nm的紫外光区(2)400～760nm的可见光区，(3)2.5～25μm（按波数计为4000cm ～400cm ）的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度，所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定，定期进行校正检定。紫外分光光度计与可见光分光光度计的区别
紫外可见分光光度计与可见分光光度计的区别是测定波长范围不同，紫外一般用氢灯，测定波长范围180～350nm,可见一般用钨灯，测定波长范围320～1000nm。
所谓紫外可见分光光度计也就是说这个仪器可以更换光源，能够测定吸收峰在紫外和可见光部分的化合物。发现吸光度超过2，便不再显示，是正常现象。吸光度是透光率的负对数，吸光度超过2就是说透光率小于1％，低于仪器的检出限，就不再显示了。至于能不能用分光光度计，取决于你测定的波长。
分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白
定量以及细菌生长浓度的定量。
仪器主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。
包括波长范围为400~760 nm的可见光区和波长范围为200～400 nm的紫外光区.不同的光源都有其特有的发射光谱，因此可采用不同的发光体作为仪器的光源.
钨灯的发射光谱：钨灯光源所发出的400～760nm波长的光谱光通过三棱镜折射后，可得到由红橙，黄绿，蓝靛，紫组成的连续色谱；该色谱可作为可见光分光光度计的光源.
氢灯（或氘灯）的发射光谱：氢灯能发出185～400 nm波长的光谱可作为紫外光光度计的光源.
物质的吸收光谱(1)
如果在光源和棱镜之间放上某种物质的溶液，此时在屏上所显示的光谱已不再是光源的光谱，它出现了几条暗线，即光源发射光谱中某些波长的光因溶液吸收而消失，这种被溶液吸收后的光谱称为该溶液的吸收光谱.
不同物质的吸收光谱是不同的.因此根据吸收光谱，可以鉴别溶液中所含的物质.
物质的吸收光谱(2)
当光线通过某种物质的溶液时透过的光的强度减弱.因为有一部分光在溶液的表面反射或分散，一部分光被组成此溶液的物质所吸收只有一部分光可透过溶液.
入射光= 反射光 + 分散光 + 吸收光 + 透过光
如果我们用蒸馏水(或组成此溶液的溶剂)作为"空白"去校正反射，分散等因素造成的入射光的损失则：
入射光 = 吸收光 十 透过光
1.分光光度计按照波长及应用领域的不同可以分为：
（1）可见光分光光度计：测定波长范围为400～760 nm的可见光区；
（2）紫外分光光度计：测定波长范围为200～400nm的紫外光区；
（3）红外分光光度计：测定波长范围为大于760nm的红外光区；
（4）荧光分光光度计：用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱；
（5）原子吸收分光光度计：光源发出被测的特征光谱辐射，被经过原子化器后的样品蒸气中的待测元素基态原子所吸收，通过测定特征辐射被吸收的大小，来求出被测元素的含量。
2.分光光度计按自动化程度分类：可分为手动、半自动、自动分光光度计。
3.分光光度计按软件可分为：带扫描、不带扫描。
种类繁多，但不外乎简易型、中档型和高档型三大类。我们在选用分光光度计时需要考虑以下几个方面：
1.波长检测范围，波长选择方式：越高档的仪器波长检测范围越宽，当然价格也较高，用户需要根据自己的需求选择合适的波长范围；对于简单型的仪器，波长选择方式一般是手动查找，这种方式的重复性较差，高档型的仪器中波长可以按照设定模式自动查找或扫描，其次高档型的波长扫描速度的档位也会增加。
2.光束：光束类型分为单光束型，双光束型或准双光束型。单光束一般适于在给定波长处测量吸光度，不能作全波段光谱扫描，并且要求光源和检测器具有很高的稳定性；双光束可以自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析；假双光束也就是比例双光束，优点是可以监测光源变化带来的误差，它的原理是由同一单色器发出的光被分成两束，一束直接到达检测器，另一束通过样品后到达另一个检测器。但是这种方式并不能消除参比造成的影响。
3.光源:可见光区主要用钨灯，卤钨(320～2500nm)；紫外区主要用氢灯，氘灯(180～375nm)；氙灯在紫外和可见光区均可用作光源。
4.样品支架：简单的样品支架为推拉式四联池架，一次只能测量一个样品，参比和样品分两次测量；高档型的样品池支架为两个固定式，分别是样品通道和参比通道，可以同时测量参比和样品的吸光值。
5.狭缝：简易型的狭缝一般是固定宽度模式，狭缝宽度多数为2nm,也有1.5nm的；高档型的仪器狭缝均为连续可调型，可以适应高分辨率的需要。
6.光学性能指标：光学性能的高低直接影响到测量的准确性，其中光栅的技术指标尤为重要。高档型仪器的光栅质量较好，一般*光栅为凹面型，并且大尺寸的凹面光栅对应的刻槽数越多，因此在分辨率和杂散光方面指标要优于简易型仪器。
7.检测器：检测器是利用光电效应，将透过溶液的光信号转换为电信号，并将电信号放大的装置。简易型仪器一般采用光敏二极管；中档型仪器采用硅光二极管；高档型仪器的检测器使用高灵敏度的光电倍增管和红外检测器。
8.显示器：简易型仪器多为机械表头或数码管显示器，没有数据处理器；高档型仪器的显示器为液晶式或连接电脑，数据处理可由仪器自身具有的或外接计算机处理。
9.测量模式：简易型仪器多为定点(固定波长)吸光度或透过率测量方式，基本不能进行波长扫描测量；高档型仪器的测量模式较多，可以显示透过率、吸光度、浓度直接读数、单光束，单点及扫描均可。
10.测量附件：衡量仪器质量高低的重要方面是看仪器是否具有丰富的附属测量器件，如偏振附件、积分球附件、反射附件、自动进样器附件、色度分析软件、薄膜附件。
11.测量样品的状态：可见和紫外的分光光度计一般测量液态样品，红外分光光度计一般能分析各种状态(气、液、固)的试样。
分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光线透过测试的样品后，部分光线被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，其关系如下式：
A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc
式中 ：A 为吸光度；
I。为入射的单色光强度；
I 为透射的单色光强度；
T 为物质的透射率；
k 为摩尔吸收系数；
L 为被分析物质的光程，即比色皿的边长
c 为物质的浓度
物质对光的选择性吸收波长，以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后可用同样条件将该供试品配成溶液，测定其吸收度，即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区，除某些物质对光有吸收外，很多物质本身并没有吸收但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定，故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多，且常使用单色光纯度较差的仪器，故测定时应用标准品或对照品同时操作。
独特的双光路、双光束光学系统，仪器分辨率更高，杂散光更低，稳定性、可靠性更强，分析更加准确
采用320*240位点阵式高亮6 ”液晶显示器，显示清晰，信息完备
独特的长光程光路设计，使仪器分辨率更高，尤其适合微量测试强大的数据处理功能，使测试结果能得到充分的应用，用户编辑更为简单快捷
采用悬架式光学系统设计，整体光路独立固定在16mm厚的铝制无变形基座上，底板的变形和外界的震动对光学系统不产生任何影响，从而大大提高了仪器的稳定性和可靠性
采用同步正弦机构，波长准确度高，重复性好
采用ARM系统
0.1/0.2/0.5/1.0/2.0/4.0六档光谱带宽自动可选，满足不同用户的测量需求
24位高速、高精度A/D转换，仪器精度更高、反应速度更快
主要元件采用进口配置，使仪器杂散光更低、稳定性、可靠性更强
功能更加强大，主机可独立完成光度测量、定量测量、光谱扫描、动力学、DNA/蛋白质测试，多波长测试及数据打印等功能
充分考虑不同用户的使用习惯，本系列仪器都标配元析公司光谱扫描软件，联机操作时，除能实现主机的所有测试功能外，还可实现更为强大的数据处理功能，并且使数据存储达到无限
型号UV-9000波长范围190-900nm光谱带宽0.1/0.2/0.5/1.0/2.0/4.0nm六档可选波长准确度±0.1nm（D2 656.1nm）， ±0.3nm全区域波长重复性≤0.1nm
±0.2%T光度重复性≤0.1%T杂散光≤0.01%T稳定性±0.0004A/h（500nm处）基线平直度
±0.001A
噪声水平 ±0.0004A/h光度范围0-200%T、-4.0-4.0A、0-9999C数据输出USB接口光学系统双光束、原装进口光栅显示系统320*240位高亮6"大屏幕LCD光源进口长寿命钨灯、氘灯检测器原装进口检测器外形尺寸635*440*210mm电源
AC 220V/50Hz或110V/60Hz
重量30kg技术参数
波长范围：320∽1000nm
光谱带宽：4nm
杂散光：≤0.5%（在360nm处）
波长准确度：优于±2nm
透射比准确度：≤±1nmT
核酸的定量是分光光度计使用频率*功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的*吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算，从而得出相应的样品浓度。测试前，选择正确的程序，输入原液和稀释液的体积，尔后测试空白液和样品液。然而，实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器，表现出的吸光值漂移越大。
事实上，分光光度计的设计原理和工作原理，允许吸光值在一定范围内变化，即仪器有一定的准确度和*度。如Eppendorf Biophotometer的准确度≤1.0%（1A）。这样多次测试的结果在均值1.0%左右之间变动，都是正常的。另外，还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值，离子浓度等：在测试时，离子浓度太高，也会导致读数漂移，因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液，如TE，可大大稳定读数。样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素：由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒，尤其是核酸样品。这些小颗粒的存在干扰测试效果。为了*程度减少颗粒对测试结果的影响，要求核酸吸光值至少大于0.1A，吸光值*在0.1-1.5A。在此范围内，颗粒的干扰相对较小，结果稳定。从而意味着样品的浓度不能过低，或者过高（超过光度计的测试范围）。较后是操作因素，如混合要充分，否则吸光值太低，甚至出现负值；混合液不能存在气泡，空白液无悬浮物，否则读数漂移剧烈；必须使用相同的比色杯测试空白液和样品，否则浓度差异太大；换算系数和样品浓度单位选择一致；不能采用窗口磨损的比色杯；样品的体积必须达到比色杯要求的最小体积等多个操作事项。
除了核酸浓度，分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度，如A260/A280的比值，用于评估样品的纯度，因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品，比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子。纯样品，A320一般是0。
蛋白质的直接定量（UV
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